新冠病毒的快速檢測對于對于病毒攜帶或感染者的篩查至關重要，也是影響疫情防控的關鍵因素。當前，實時熒光RT-PCR依然是病毒檢測的主要方法，而分析科學家正嘗試利用MALDI-TOF的簡單、快速、準確和靈敏等特點，將Affi-BAMS這一靶向蛋白組學的研究方法應用于新冠病毒的檢測和分析中。與核酸檢測不同，Affi-BAMS可以特異性的檢測病毒抗原的S蛋白，為新冠病毒的檢測和研究提供新的思路。

 

       Affi-BAMS是什么？

       Affi-BAMS是Affinity-Bead Assisted Mass Spectrometry（親和磁珠輔助質譜技術）的簡稱，是一種利用免疫親和技術對靶蛋白（多肽）進行特異性檢測的解決方案。該方案是基于布魯克MALDI-TOF質譜技術，由布魯克和Adeptrix公司共同開發。Affi-BAMS將免疫磁珠，微陣列和MALDI-TOF質譜三種常見生化分析技術結合起來，可以實現多靶點的蛋白檢測和定量。

 

       Affi-BAMS怎么做？

       生物樣本首先進行細胞裂解，裂解后的蛋白溶液進行酶解，被抗體包被的磁珠加入酶解后的多肽溶液中形成懸浮液，經孵育后，目標多肽被磁珠上的抗體捕獲。結合多肽的磁珠被轉移至可導電的載玻片上，這一載玻片與多孔格硅橡膠墊片緊密貼合，每個磁珠被硅膠網格獨立隔開，經過多孔格硅橡膠墊片的介導，磁珠在載玻片上呈微陣列分布。通過基質噴霧儀對磁珠陣列進行MALDI基質的噴涂，磁珠陣列暴露在含有MALDI基質的氣溶膠里，其上結合的多肽會被洗脫到各自的微孔中。待溶劑蒸發后，洗脫得到的多肽與MALDI基質在載玻片上形成共結晶的斑點。將硅橡膠墊片移除，空氣流吹走載玻片上殘留的磁珠，通過MALDI-TOF分析載玻片上的每個獨立的陣列斑點，可以得到相應斑點中存在的多肽的質譜信息。

 

       Affi-BAMS有何用？

       Affi-BAMS在靶向蛋白組學中有廣泛的應用，目前已經研發出一系列試劑盒，可以實現對特定靶蛋白的檢測和定量分析。以阿爾茲海默癥的研究為例，為經過免疫磁珠富集后，正常人和患者腦脊液中β-淀粉樣蛋白MALDI-TOF分析結果的對比情況，該方法可以特異性地鑒別從aa672到aa713的19個多肽片段。以其中Aβ1–40多肽為基準對其他多肽的MALDI-TOF質譜圖進行歸一化處理后，可以看出正常人和患者樣本中β-淀粉樣蛋白的含量存在明顯差異。

 

       Affi-BAMS還能檢測病毒？

       Affi-BAMS可以用于新冠病毒抗原的檢測，使用免疫磁珠特異性結合病毒的S蛋白（spike S glycoprotein），可以實現微量樣本中S蛋白的富集，大大提高質譜分析的靈敏度，富集后的蛋白采用MALDI-TOF進行分析，從而實現新冠病毒的快速檢測。目前，針對于新冠病毒S蛋白的免疫磁珠已經處于最終測試階段。